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產(chǎn)品名稱：小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn)：小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品人無色素睫狀上皮細(xì)胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μg 人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株;7WCY1.0 食管癌細(xì)胞，TE-1細(xì)胞 PK-15細(xì)胞，豬腎細(xì)胞系 綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子細(xì)胞;U14-GFP 人成纖維母細(xì)胞-新生兒(HDF-n)MA,
產(chǎn)品型號(hào)：
更新日期：2024-12-16
訪問次數(shù)：312
小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞的詳細(xì)資料：
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠骨骼肌成纖維分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長(zhǎng)柱形的多核細(xì)胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官，有豐富的血管、淋巴分布，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張，進(jìn)行隨意運(yùn)動(dòng)。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點(diǎn)、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌成纖維細(xì)胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細(xì)胞膜下方。骨骼肌間質(zhì)中有很多成纖維細(xì)胞。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞 | 組織來源 | 骨骼肌組織 |
英文名稱 | Mouse Skeletal Muscle Fibroblast Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨骼肌成纖維采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨骼肌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白5 英文名稱： human Insulin like Growth Factor Binding Protein 5 規(guī)格： 英文縮寫： IGFBP5
胰島素 英文名稱： Human Insulin 規(guī)格： 英文縮寫： INS
細(xì)胞間粘附分子1 英文名稱： Human Iercellular Adhesion Molecule 1 規(guī)格： 英文縮寫： ICAM-1
干擾素α受體 英文名稱： Human Ierferon α Receptor 規(guī)格： 英文縮寫： IFNαR
鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA 試劑盒
Human ai prothrombin aibody (aPT1/aPT2) ELISA Kit 人抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)試劑盒
HumanInsulieceptorβ,ISR-βELISAKIT 人胰島素受體β(ISR-β)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforACV-A(MouseActivinA)ELISAKit小鼠活化素A
血液組織蛋白酶L(CATHEPSINL)活性熒光定量試劑盒20次
MouseProgesterone,PROGELISAKit小鼠孕激素/孕同(PROG)試劑盒
HGF重組大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 Protein
EpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule 0.5mgEpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule) 上皮細(xì)胞粘附分子/表皮細(xì)胞粘附分子抗原
IL23重組人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein
CALML3 Protein Human 重組人 CALML3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
LTA4H Protein Mouse 重組小鼠 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 (His 標(biāo)簽)
EpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule 0.5mgEpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule) 上皮細(xì)胞粘附分子/表皮細(xì)胞粘附分子抗原
CALML3 Protein Human 重組人 CALML3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HGF重組大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 Protein
LTA4H Protein Mouse 重組小鼠 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IL23重組人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein
小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞大鼠胱硫醚β-合酶(CBS)試劑盒 ，英文名： CBS ELISA Kit
Rabbit collagen type III (Col III) ELISA Kit 兔子Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)試劑盒
百日咳桿菌(BP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMMP-2/GelatinaseAELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)免疫捕獲試劑盒20次
ELISAKitPSA犬前列腺特異性抗原
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