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產(chǎn)品名稱：人結(jié)腸成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品特點：人結(jié)腸成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品J774A.1 小鼠巨噬細(xì)胞 人胰腺星狀細(xì)胞培養(yǎng)基 IP6K1 Others Human 人 IHPK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 CASK Others Human 人 CASK Kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品型號：
更新日期：2024-12-11
訪問次數(shù)：358
人結(jié)腸成纖維細(xì)胞的詳細(xì)資料：
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡介：
人結(jié)腸成纖維分離自結(jié)腸組織；結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M"，將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結(jié)締組織），肌層（內(nèi)環(huán)形、外縱行兩層平滑肌），外膜（纖維膜或漿膜）。結(jié)腸成纖維細(xì)胞主要分布于外膜（纖維膜或漿膜）結(jié)締組織內(nèi)。成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的結(jié)腸成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
產(chǎn)品名稱 | 人結(jié)腸成纖維細(xì)胞 | 組織來源 | 結(jié)腸 |
英文名稱 | Human Colonic Fibroblast Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介：
實驗室分離的人結(jié)腸成纖維采用 - 膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的人結(jié)腸成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3-5代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
人結(jié)腸成纖維體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
注意事項：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA 試劑盒
Neuropeptide Y (NP-Y) ELISA Kit 人神經(jīng)肽Y(NP-Y)檢測試劑盒
HumancyclophilinB,CyPBELISAKit 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CyPB)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-macrophageaibody檢測試劑盒人抗巨噬細(xì)胞抗體(ai-macrophageAb)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物培養(yǎng)細(xì)胞DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒20次
Humanurokinase-typeplasminogenactivator,uPA/PLAUELISAKit人型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
CNTN3重組大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
FABP(brain 0.5mgFABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain) 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原
VSIG2重組人 VSIG2 / CTXL 蛋白 Protein
CGB7 Protein Human 重組人 CGB7 蛋白
DDR2 Protein Mouse 重組小鼠 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白
FABP(brain 0.5mgFABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain) 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原
CGB7 Protein Human 重組人 CGB7 蛋白
CNTN3重組大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
DDR2 Protein Mouse 重組小鼠 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白
VSIG2重組人 VSIG2 / CTXL 蛋白 Protein
小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat erythropoietin (EPO) ELISA Kit 大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)檢測試劑盒
Humanpeptidoglycan,PGELISAKit 人肽聚糖(PG)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickeumornecrosisfactorα,TNF-α檢測試劑盒雞壞死因子α(TNF-α)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞TNFBETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MouseEsadiol,E2ELISAKit小鼠雌二醇(E2)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
人結(jié)腸成纖維細(xì)胞小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體檢測試劑盒 小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒、小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠橫紋肌輔肌動蛋白檢測試劑盒 小鼠橫紋肌輔肌動蛋白試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠橫紋肌輔肌動蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠橫紋肌輔肌動蛋白試劑盒、小鼠橫紋肌輔肌動蛋白eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1檢測試劑盒 豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒、豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
豚鼠主要組織相容性復(fù)合體檢測試劑盒 豚鼠主要組織相容性復(fù)合體試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 豚鼠主要組織相容性復(fù)合體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠主要組織相容性復(fù)合體試劑盒、豚鼠主要組織相容性復(fù)合體eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
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